Morris水迷宮實(shí)驗是一種強迫實(shí)驗動(dòng)物(大鼠、小鼠)游泳,學(xué)習尋找隱藏在水中的平臺的一種實(shí)驗,主要用于測試實(shí)驗動(dòng)物對空間位置覺(jué)和方向覺(jué)(空間定位)的學(xué)習記憶能力。它廣泛應用于學(xué)習記憶、阿爾茨海默病、海馬和外海馬、智力與衰老、新藥開(kāi)發(fā)/篩選/評價(jià)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預防醫學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動(dòng)物心理學(xué)、行為生物學(xué)及時(shí)辰生物學(xué)等多個(gè)學(xué)科的科學(xué)研究和計算機輔助教學(xué)(CAI)。
一、實(shí)驗目的
檢測動(dòng)物的空間記憶和探索能力。
二、實(shí)驗原理
大(小)鼠雖然天生會(huì )游泳,但是它們性喜干燥,厭惡潮濕,同時(shí)游泳對于其而言是十分消耗體力的活動(dòng),因此它們會(huì )本能地尋找水中的休息場(chǎng)所。尋找休息場(chǎng)所的行為涉及一個(gè)復雜的記憶過(guò)程,包括收集與空間定位有關(guān)的視覺(jué)信息,再對這些信息進(jìn)行處理、整理、記憶、加固,然后再取出,目的是能成功地“航行"并且找到隱藏在水中的站臺,終從水中逃脫。
三、實(shí)驗材料與方法
(一)實(shí)驗材料
1.實(shí)驗設備 Morris水迷宮。
2.實(shí)驗動(dòng)物及分組
(1)大鼠或小鼠(本實(shí)驗以大鼠為例)。
(2)根據實(shí)驗目的將大鼠分組,并將每只大鼠編號。
(3)分籠飼養,自由飲食,動(dòng)物房溫度21~25℃,相對濕度40%~60%,自然光照晝夜節律變化。
(二)實(shí)驗具體方法
將各組大鼠在正式訓練前一天分別放入水中自由游泳2min,使其熟悉水迷宮環(huán)境。然后對各組大鼠正式進(jìn)行Morris水迷宮測試。實(shí)驗采用航行定位實(shí)驗和空間探索實(shí)驗分別測試大鼠的學(xué)習能力和記憶能力。
1.定位航行實(shí)驗共5d 將大鼠從標記的4個(gè)入水點(diǎn)依次朝向池壁輕輕放入水中,采集大鼠在2min內尋找到并爬上平臺所用的時(shí)間(平臺在第3象限,平臺低于水位2cm左右),即逃避潛伏期(在站臺上穩定10s算找到站臺,否則繼續記錄)。如果大鼠2min內未找到平臺,需將其牽引到平臺,并停留60s,這時(shí)潛伏期記為2min。
2.空間探索實(shí)驗1d 撤除平臺,將大鼠放入水池中,記錄大鼠在2min內在平臺所放置的目標象限停留時(shí)間和穿越平臺所在區域的次數。
(三)實(shí)驗操作中的注意事項
(1)在開(kāi)始實(shí)驗前,實(shí)驗者應與受試動(dòng)物建立良好的感情,讓動(dòng)物熟悉實(shí)驗者的身體信息,如氣味、相貌等。捕捉動(dòng)物的動(dòng)作要溫柔,忌諱手抓鼠尾,以免過(guò)分刺激動(dòng)物。鼠的嗅覺(jué)很敏感的,在實(shí)驗過(guò)程中應當避免使用較強氣味的化妝品或香水。另外。如果大鼠能夠看到實(shí)驗者,在水迷宮實(shí)驗過(guò)程中,實(shí)驗者要躲藏或者保持固定位置,避免造成大鼠能夠看到人體移動(dòng)。
(2)水池不能太小,站臺也不能太大,水池太小或站臺太大都會(huì )增加大鼠隨機上臺的概率,出現假陽(yáng)性結果。目前大鼠水迷宮的直徑大多為1.2m或1.6m,本實(shí)驗所采用的直徑是1.6m。
(3)水溫對逃避潛伏期影響很大:如果溫度過(guò)高,大鼠游幾次后漸漸適應迷宮環(huán)境,就把迷宮當成“浴盆",在泳池中漂浮不動(dòng);如果溫度過(guò)低,大鼠體溫下降很快,體力也會(huì )耗散太多,不能堅持很久,就會(huì )出現游幾次潛伏期突然增大的現象。所以要保證水溫在23~25℃。
(4)要保證水迷宮水面上沒(méi)有光影,主要是避免光線(xiàn)在水面的反射,以免留在水面的光照影子被軟件的采集系統混淆為大鼠的影子,影響結果自動(dòng)分析大鼠中心點(diǎn)。將屋子里的燈都關(guān)掉,窗簾都拉上,切斷光源。
(5)盡量保證實(shí)驗室內所有大鼠能夠看到的外參在實(shí)驗過(guò)程中都要位置固定。
(6)大鼠訓練完成后要用干布擦拭。并用烤爐烤干。